Jonesborough er en by og fylkessete i Washington County i delstaten Tennessee, som ligger i sørøstlige USA. Per 2020 var befolkningen 5 860.
Denne byen regnes som «den eldste i Tennessee».
Jonesborough er en del av Johnson City Statistical Area og er en del av den større Johnson City-Kingsport-Bristol, Tennessee og Virginia Combined Statistical Area, som vanligvis kalles «Three Cities».
Denne byen ligger i det nordøstlige hjørnet av delstaten og ble grunnlagt av europeiske amerikanere i 1779. Dette var 17 år før Tennessee ble med i De forente stater og på et tidspunkt da området var under jurisdiksjonen til North Carolina.
Navnet kommer fra Willie Jones, en lovgiver fra North Carolina som støttet delstatens ekspansjon mot Appalachene-regionen.
Jonesborough var opprinnelig en del av Washington County. I 1784 ble den hovedstaden i den autonome staten Franklin. Imidlertid anerkjente Kongressen aldri Franklin, og sent i 1788 ble regionen returnert til North Carolina sin jurisdiksjon.
